不同粗饲料组合全混合日粮对泌乳奶牛体外瘤胃挥发性脂肪酸生成动力学特性的影响

动物营养学报２０１３，２５（１２）：２９２０—２９２７　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＡｎｉｍａｌ　Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６－２６７ｘ．２０１３．１２．０１９　不同粗饲料组合全混合日粮对泌乳奶牛体外瘤胃　挥发性脂肪酸生成动力学特性的影响　白萨茹拉杨红建　李胜利　（中国农业大学动物科学技术学院，动物营养学国家重点实验室，北京１００１９３）　摘　要：本试验旨在研究不同粗饲料组合全混合日粮（ＴＭＲ）对泌乳奶牛体外瘤胃挥发性脂肪　酸生成动力学特性的影响。选用４头体重、年龄、泌乳期和日均产奶量相近、安装有永久性瘤胃　瘘管的荷斯坦奶牛作为试验动物，分别饲喂４种ＴＭＲ。ＴＭＲ精饲料组成相同，精粗比为６１：３９，　粗饲料组合分别为１００％玉米秸（ＴＭＲ１）、５０％玉米秸＋５０％玉米秸黄贮（ＴＭＲ２）、５０％玉米秸　黄贮＋５０％羊草（ＴＭＲ３）、５０％羊草－４－５０％全株玉米青贮（ＴＭＲ４）。在预试期１５　ｄ后，晨饲前　采集各头奶牛瘤胃液，分别以各头奶牛所饲喂的ＴＭＲ为底物，进行体外批次培养试验，采样时　间点分别为发酵后２、５、ｌ０、ｌ４、２０、２７、３６、４８和７２　ｈ。结果表明：ＴＭＲ４乙酸产量潜在增幅　（４６．８　ｍｍｏＬ／Ｌ）最低，极显著低于其他ＴＭＲ（Ｐ＜０．０１）；ＴＭＲ２乙酸产量增速常数（０．１４％／ｈ）　和日产量（２９．０１　ｍｏｌ／ｄ）最高，分别显著（Ｐ＜０．０５）和极显著（Ｐ＜０．Ｏ１）高于其他３种ＴＭＲ。　ＴＭＲ２丙酸产量潜在增幅（８．０　ｒｅｔｏｏｌ／Ｌ）最低，极显著低于其他ＴＭＲ（Ｐ＜０．０１），ＴＭＲ１　（１３．５　ｍｍｏＶＬ）最高，但与ＴＭＲ３和ＴＭＲ４之间差异不显著（Ｐ＞０．０５）；不同ＴＭＲ丙酸产量增　速常数差异不显著（Ｐ＞０．０５）；ＴＭＲ２丙酸日产量最低（１．３５　ｍｏＶｄ），显著低于ＴＭＲ３和ＴＭＲ４　（Ｐ＜０．０５）。不同ＴＭＲ丁酸产量潜在增幅差异不显著（Ｐ＞０．０５）；ＴＭＲ３丁酸产量增速常数　（０．０９１％／ｈ）和日产量最高（２．８２　ｍｏｌ／ｄ），分别极显著（Ｐ＜０．０１）和显著（Ｐ＜０．０５）高于其他　ＴＭＲ。综上所述，不同粗饲料组合ＴＭＲ瘤胃微生物发酵乙酸、丙酸和丁酸生成动力学参数存在　显著差异，但采用体外批次培养法测算的奶牛瘤胃乙酸、丙酸、丁酸日产量较同位素示踪体内法　偏低，故不适于测算奶牛体内挥发性脂肪酸日产量。　关键词：粗饲料组合；泌乳奶牛；挥发性脂肪酸；体外批次培养法　中图分类号：￥８２３　文献标识码：Ａ　文章编号：１００６—２６７Ｘ（２０１３）１２—２９２０－０８　肪酸（ＶＦＡ）产量　Ｊ。早在２０世纪６０和７０年　近十年来，我国奶牛养殖业发展迅速，但与发　达国家相比，苜蓿等优质牧草供给不足成为制约　提高产奶量及奶品质的重要影响因素。为了提高　奶品质及养殖效益，缓解草、畜供给矛盾，如何进　一代，就有研究得出奶牛和绵羊瘤胃微生物消化代　谢主要ＶＦＡ产物乙酸、丙酸和丁酸产量约占总挥　发性脂肪酸（ＴＶＦＡ）的９５％Ｅ４　，不仅可为宿主机　步提高我国农作物秸秆等粗饲料资源饲用效率　体提供能量，而且是乳脂和体脂合成的重要前体　物　Ｊ。有研究报道，瘤胃中产生的７６％ＶＦＡ可被　瘤胃上皮吸收　，有一些研究采用同位素示踪法　备受关注。瘤胃是反刍家畜进行微生物消化主要　场所，饲粮养分结构和组成可以改变瘤胃微生物　区系和数量，进而影响养分消化分解及挥发性脂　收稿日期：２０１３—０７—２２　测定了绵羊瘤胃中ＶＦＡ日产量　’加Ｊ，发现因部　基金项目：国家重点基础科学研究计划（２０１１ＣＢ１００８０１）；国家科技支撑计划项目（２０１２ＢＡＤ１２Ｂ０２）　作者简介：白萨茹拉（１９８５一），女，内蒙古通辽人，硕士研究生，反刍动物营养研究方向。Ｅ—ｍａｉｌ：ｂｓ１ｆ．ｃａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ＠１６３．ＣＯｒｎ　通讯作者：杨红建，副教授，博士生导师，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｎｇ—ｈｏｎｇｊｉａｎ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ　１２期　白萨茹拉等：不同粗饲料组合全混合日粮对泌乳奶牛体外瘤胃挥发性脂肪酸　分ＶＦＡ以不同速率被瘤胃壁吸收进入血液　卜Ｈ　Ｊ，　很难通过体内法准确地测定各ＶＦＡ产量。由于同　１材料与方法　１．１试验动物和饲粮设计　位素示踪法本身费时费力，且对试验动物和操作　者具有一定侵害性，近半个世纪以来并未被广泛　采用。Ｃｏｒｌｅｙ等　首次尝试利用体外批次培养　法，发现这一方法得到的ＶＦＡ日产量与饲喂相同　饲粮的绵羊的体内法测定结果十分相近。本试验　基于体外批次培养法，测定不同粗饲料组合全混　合日粮（ＴＭＲ）饲喂条件下，泌乳奶牛体外瘤胃微　生物发酵产物乙酸、丙酸和丁酸日产量。　选用４头体况良好，年龄为４岁，体重　［（５４３．４－４５）ｋｇ］、泌乳期［（６０±１３）ｄ］和日均产　奶量［（１８．４７±０．７７）ｋｇ］相近，安装有大口径永　久性瘤胃瘘管的荷斯坦奶牛作为试验动物，每天　０７：ｏ０和ｌ９：００分２次饲喂。　试验全混合日粮组成及营养水平见表１，全天　自由饮水。试验期为１８　ｄ，前ｌ５天为预试期，后３　天为瘤胃液采样期。　表１试验全混合日粮组成及营养水平（干物质基础）　Ｔａｂｌｅ　１　Ｃｏｍｐｏｓｉｉｔｏｎ　ａｎｄ　ｎｕｔｒｉｅｎｔ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ＴＭＲｓ（ＤＭ　ｂａｓｉｓ）　％　”精饲料组成Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ　ｃｏｍｐｏｓｉｉｔｏｎ：玉米ｃｏｒｎ　５３％、豆粕ｓｏｙｂｅａｎｍｅａｌ１４％、棉籽粕ｃｏａｏｎｓｅｅｄｍｅａｌ　７％、菜籽粕ｒａｐｅ—　ｓｅｅｄ　ｍｅａｌ　４％、小麦麸ｗｈｅａｔ　ｂｒａｎ　５％、酒糟ｄｉｓｉｔｌｌｅｒ’Ｓ　ｇｒａｉｎｓ　１２％、石粉ｌｉｍｅｓｔｏｎｅ　１％、磷酸氢钙ＣａＨＰＯ４　１％、食盐ＮａＣ１　１％、　小苏打ＮａＨＣＯ３　ｌ％、预混料ｐｒｅｍｉｘ　１％。　产奶净能为计算值　，其余营养水平为实测值。非纤维性碳水化合物（％）＝１（中性洗涤纤维＋粗蛋白质＋粗脂　肪＋粗灰分）。ＮＥＩ．ｗａｓ　ａ　ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ　ｖａｌｕｅ，ｗｈｉｌｅ　ｔｈｅ　ｏｔｈｅｒ　ｎｕｔｒｉｅｎｔ　ｌｅｖｅｌｓ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｖａｌｕｅｓ．ＮＦＣ（％）＝１　ｘ（ＮＤＦ＋ＣＰ＋　ＥＥ＋Ａｓｈ１．　１．２体外批次培养　在６５℃分别烘干各试验ＴＭＲ样品，粉碎过　２　ｍｍ分级筛后作为发酵底物。称取每种ＴＭＲ　５００　ｍｇ置于总容积为１４０　ｍＬ具有气、液取样口　的厌氧发酵瓶中。参考Ｃｏｒｌｅｙ等　副的体外批次　在试验奶牛食糜采样期内，晨饲前分别自饲喂　ＴＭＲ１、ＴＭＲ２、ＴＭＲ３、ＴＭＲ４奶牛瘤胃不同部位采　集瘤胃液，４层纱布过滤后，分别置于３９℃预热保　温瓶中带回实验室。用５０　ｍＬ注射器向上述发酵　瓶中加入饲喂相应ＴＭＲ奶牛的瘤胃液２５　ｍＬ，加　培养法，向每个发酵瓶中加入５０　ｍＬ配制好的ｐＨ　６．８５缓冲液　，通人ＣＯ　５　ｓ后，加上几丁质胶　塞，拧紧瓶盖，在恒温生化培养箱中预热至３９℃。　上胶塞和拧紧瓶盖后，置于３９℃恒温生化培养箱　中进行培养。每种ＴＭＲ设５个重复，分别于发酵　后０、２、５、１０、１４、２０、２７、３６、４８和７２　ｈ时，用１　ｍＬ　动物营养学报　医用注射器自发酵瓶液体取样口采集ｌ　ｍＬ发酵　液，立即加入３００　Ｌ的２５％偏磷酸溶液，４℃静　放３０　ｒａｉｎ后，１０　０００×ｇ离心，取上清样于一２０℃　冻存，待测ＶＦＡ产量。　１．３分析测定与计算　发酵液上清液样品解冻后，用微量进样器吸　取０．５　ＩｘＬ待测样，通过安装有１５　ｍ×０．５３　ｍｍ毛　细管柱和氢火焰离子化检测器的ＧＣ５２２型气相色　谱仪（上海伍丰科学仪器有限公司）以高纯氮气为　载气分析测定ＶＦＡ产量。色谱条件：气化室温度　２５０　ｏＣ、柱箱温度１２０　ｏＣ。　利用ＳＡＳ　９．１．３统计软件ＮＬＩＮ过程按照以　下函数模型　副进行非线性拟合计算：　Ｙ＝ａ—ｂ×ｅ－ｃｘｔ　（１）　式中：ｌ，为ＶＦＡ产量（ｍｍｏｌ／Ｌ），ａ为发酵液　中ＶＦＡ理论最大产量（ｍｍｏｌ／Ｌ），ｂ为随发酵时间　延长ＶＦＡ产量潜在增幅（ｍｍｏｌ／Ｌ），Ｃ为ＶＦＡ产　量增速常数（％／ｈ）；ｔ为发酶时间（ｈ）。　根据式（１），随发酵时间延长，发酵瓶中底物　不断减少，ＶＦＡ产量不断增加达到最大值时，对上　面的指数函数进行一阶导数转换后，ＶＦＡ生成速　率可以表述为以下函数模型：　ｄｙ／ｄｔ＝ｂ　Ｘ　Ｃ　Ｘ　ｅ－Ｃ　Ｘｔ　（２）　式中：ｄｙ／ｄｔ为ＶＦＡ生成速率（ｍｍｏｌ／ｈ）。　根据式（２），当发酵时间ｔ　ｉＤ　０时，可以回推得　到晨饲前泌乳奶牛瘤胃液采样时的ＶＦＡ生成速率　为ｂ　Ｘ　Ｃ。假定４头体重为（５４３±４５）ｋｇ奶牛瘤胃　平均容量５４　Ｌ＿ｌ　，则可根据式（３）分别计算出饲　喂ＴＭＲ对应的奶牛乙酸（Ｙａｃ。）、丙酸（ｙ口　。）和丁酸　日产量（ｙｈ　）。以乙酸日产量为例，计算公式为：　ｙａｃ。＝ｂ　Ｘ　Ｃ　Ｘ　Ｔ　Ｘ　Ｄ　Ｘ　５４／１　０００　（３）　式中：ｙａ。　为乙酸Ｅｌ产量（ｍｏｌ／ｄ），ｂ　。。为随发　酵时间延长乙酸产量潜在增幅（ｍｍｏｌ／Ｌ），Ｃ　。。为　ＴＭＲ发酵乙酸产量增速常数（％／ｈ），Ｔ昼夜总时　长２４　ｈ，Ｄ为瘤胃液的稀释系数（本试验中　Ｄ　ｎ－－３）。　１．４数据处理及统计分析　数据经Ｅｘｃｅｌ整理后，采用ＳＡＳ　９．１．３统计软　件直接读取Ｅｘｃｅｌ数据，并用ＧＬＭ过程进行单因　素方差分析，采用Ｄｕｎｃａｎ氏法和Ｍｅａｎｓ语句过程　统计不同ＴＭＲ间差异。　２　结　果　２．１　体外瘤胃发酵乙酸生成动力学参数　由表２可知，不同ＴＭＲ乙酸７２　ｈ产量差异不　显著（Ｐ＞０．０５）。ＴＭＲ２乙酸理论最大产量显著　高于ＴＭＲ３和ＴＭＲ４（Ｐ＜０．０５），ＴＭＲｌ、ＴＭＲ３和　ＴＭＲ４之间差异不显著（Ｐ＞０．０５）。ＴＭＲ４乙酸　产量潜在增幅最低，极显著低于其他３种ＴＭＲ　（Ｐ＜０．０１），ＴＭＲ１、ＴＭＲ２和ＴＭＲ３之间差异不　显著（Ｐ＞０．０５）。ＴＭＲ２乙酸产量增速常数及日　产量最高，分别显著（Ｐ＜０．０５）和极显著（Ｐ＜　０．Ｏ１）高于其他３种ＴＭＲ，其他３种ＴＭＲ间差异　不显著（Ｐ＞０．０５）。　２．２体外瘤胃发酵丙酸生成动力学参数　由表３可知，各ＴＭＲ丙酸７２　ｈ产量、理论最　大产量差异不显著（Ｐ＞０．０５）。丙酸产量潜在增　幅存在极显著差异（Ｐ＜０．Ｏ１），其中ＴＭＲ２丙酸　产量潜在增幅最低，极显著低于其他ＴＭＲ（Ｐ＜　０．Ｏ１），ＴＭＲ１最高，但与ＴＭＲ３和ＴＭＲ４之间差　异不显著（Ｐ＞０．０５）。不同ＴＭＲ间丙酸产量增　速常数差异不显著（Ｐ＞０．０５）。丙酸Ｅｔ产量　ＴＭＲ３＞ＴＭＲ４＞ＴＭＲ１＞ＴＭＲ２，ＴＭＲ３、ＴＭＲ４与　ＴＭＲ２之间差异显著（Ｐ＜０．０５）。　２．３体外瘤胃发酵丁酸生成动力学参数　由表３可知，不同ＴＭＲ丁酸７２　ｈ产量及理论　最大产量存在极显著差异（Ｐ＜０．０１），其中ＴＭＲ２　丁酸７２　ｈ产量及丁酸理论最大产量最高，极显著　高于其他ＴＭＲ（Ｐ＜０．０１）。丁酸产量潜在增幅在　不同ＴＭＲ间差异不显著（Ｐ＞０．０５）。ＴＭＲ３丁酸　产量增速常数及日产量最高，分别极显著（Ｐ＜　０．Ｏ１）和显著高于其他３种ＴＭＲ（Ｐ＜０．０５），其他　ＴＭＲ间差异不显著（Ｐ＞０．０５）。　３讨论　瘤胃微生物通常可将饲粮中纤维素、淀粉和　可溶性糖等碳水化合物首先转化为丙酮酸，丙酮　酸进入三羧酸循环（ＴＣＡ）通过不同的代谢途径分　别生成乙酸、丙酸和丁酸。对泌乳奶牛来说，乙酸　是乳腺合成乳脂中重要原料。乙酸在体内也可以　用于合成少量的葡萄糖和酮体，但乙酸在体内主　要通过乙酰辅酶Ａ在还原性辅酶Ⅱ（ＮＡＤＰＨ）作　用下合成体脂和乳脂，并以此在体内储存能量；乙　酸在体内也可以进入ＴＣＡ分解成ＣＯ。和Ｈ　，同　１２期　白萨茹拉等：不同粗饲料组合全混合日粮对泌乳奶牛体外瘤胃挥发性脂肪酸　时释放出ＡＴＰ供能。反刍动物消化吸收碳水化合　物的主要形式为ＶＦＡ，而不是葡萄糖，但其血液中　却维持着较高水平的血液葡萄糖浓度，其中丙酸　起着非常重要作用，因此丙酸对泌乳奶牛来说是　乳糖合成的重要前体物。丁酸被瘤胃壁吸收过程　中先转化为　一羟基丁酸进入肝脏和乳腺组织，参　与体内物质的代谢，尤其作为肌肉组织的能量来　源。因此乙酸、丙酸和丁酸对泌乳奶牛是不可或　饲粮精粗比的影响较大　，而各ＶＦＡ组成则主要　与饲粮ＮＦＣ／ＮＤＦ有关。有研究报道，不同品质粗　饲料饲粮可改变瘤胃发酵方式和发酵功能，在精　粗比（２０：８０）相同条件，随着分级指数（ＧＩ）的升　高，瘤胃中乙酸产量具有降低的趋势，而丙酸产量　有上升的趋势，但ＴＶＦＡ产量在不同品质粗饲料　饲粮间差异不显著　。胡红莲　研究表明，随饲　粮ＮＦＣ／ＮＤＦ的增加，瘤胃中乙酸产量呈现降低而　丙酸和丁酸产量呈现增加的趋势。　缺的代谢产物。一般认为，瘤胃中ＴＶＦＡ产量受　表２不同粗饲料组合ＴＭＲ体外瘤胃发酵乙酸生成动力学参数　Ｔａｂｌｅ　２　Ｋｉｎｅｔｉｃ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｏｆ　ａｃｅｔａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴＭＲｓ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｒｏｕｇｈａｇｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ　ａｆｔｅｒ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｌｕｍｅｎ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　同行数据肩标不同小写字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５），不同大写字母表示差异极显著（Ｐ＜０．０１），相同或无字母肩标　表示差异不显著（Ｐ＞０．０５）。下表同。　Ｖａｌｕｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｒＯＷ　ｗｉｈ　ｄｉｔｆｆｅｒｅｎｔ　ｓｍａｌｌ　ｌｅｔｔｅｒ　ｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓ　ｍｅａｎ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５），ａｎｄ　ｗｉｈ　ｄｉｔｆｆｅｒｅｎｔ　ｃａｐｉｔａｌ　ｌｅｔｔｅｒ　ｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓ　ｍｅａｎ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０１），ｗｈｉｌｅ　ｗｉｔｈ　ｈｅ　ｔｓａｍｅ　ｏｒ　ｎｏ　ｌｅｔｔｅｒ　ｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓ　ｍｅａｎ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ａｓ　ｂｅｌｌｏｗ．　表３不同粗饲料组合ＴＭＲ体外瘤胃发酵丙酸生成动力学参数　Ｔａｂｌｅ　３　Ｋｉｎｅｔｉｃ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｏｆ　ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴＭＲｓ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｒｏｕｇｈａｇｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ　ａｆｔｅｒ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｌｕｍｅｎ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　２９２４　动物营养学报　２５卷　７２　ｈ产量　Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　７２　ｈ／（ｍｍｏｌ／Ｌ）　１２．０　１５．１　ｌ２．１ｃ　理论最大产量　Ｔｈｅｏｌｏｇｉｃａｌ　ｍａｘｉｍｕｍ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ／（ｍｍｏｌ／Ｌ）　１３．５　１５．３　１２．１０。　产量潜在增幅　Ｐｏｔｅｎｔｉｌａ　ａｍｐｌｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｒｏｄｕｃｉｔｏｎ／（ｍｍｏｌ／Ｌ）　７．９　６．９　．　产量增速常数　Ａｃｃｅｌｅｒａｔｅ　ｃｏｎｓｔａｎｔ　ｏｆ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ／（％／ｈ）　０．０４１　０．０４０　０．０９１　０．０４４　０．００７　０．００８　日产量　Ｄａｉｌｙ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ／（ｍｏｌ／ｄ）　１．２９　１．０８　２．８２　１．２３　０．０９２　０．０１２　在本试验中，经体外批次培养法估测，乙酸、　丙酸和丁酸产量有不同程度的变化。这可能与不　ＴＭＲ２乙酸日产量最高。这可能是因为玉米秸黄　贮易于被微生物降解，有利于微生物繁殖。本试　验中ＮＦＣ／ＮＤＦ为ＴＭＲ２＜ＴＭＲ３＜ＴＭＲ４，由于　同粗饲料组合饲粮影响瘤胃微生物纤维素降解酶　活性有关；另一方面，不同粗饲料组合饲粮对主要　瘤胃纤维素降解菌溶纤维丁酸弧菌、产琥珀酸杆　菌和瘤胃白色球菌数量也有不同程度影响，从而　ＮＦＣ比ＮＤＦ更容易被微生物发酵，这或许也是　ＴＭＲ２乙酸日产量相对较高的原因，同时也解释了　为什么ＴＭＲ３乙酸日产量高于ＴＭＲ４。不同ＴＭＲ　影响饲料纤维素降解，改变乙酸、丙酸和丁酸的产　生　。Ｓｉｌｖａ等　认为，只饲喂秸秆类粗饲料会　导致瘤胃微生物缺乏易于消化的养分底物，限制　瘤胃微生物的生长与增殖；当同时饲喂秸秆和易　于消化的纤维性饲料时，纤维素分解菌则会首先　丙酸生成动力学参数中丙酸产量增速常数没有显　著差异，但ＴＭＲ３和ＴＭＲ４丙酸日产量比ＴＭＲ１　和ＴＭＲ２高，这可能是因为ＴＭＲ１和ＴＭＲ２粗饲　料来源均为秸秆类，纤维素等不易消化的饲料细　胞壁含量较高所致；而后２种ＴＭＲ中含有相对秸　附着于优质粗饲料上，瘤胃微生物快速增殖，进而　提高秸秆的利用率，影响乙酸、丙酸和丁酸的产　生。本体外研究结果与其体内结论相似，ＴＭＲ１只　由单种玉米秸秆组成，而ＴＭＲ２、ＴＭＲ３和ＴＭＲ４　都由不同的２种粗饲料组成，ＴＭＲ２、ＴＭＲ３和　ＴＭＲ４乙酸日产量均高于ＴＭＲ１，而未发现ＴＭＲ１　秆易于消化的羊草，提高了饲粮中可消化纤维素　的比例，因此导致ＴＭＲ３和ＴＭＲ４丙酸日产量高　于ＴＭＲ１和ＴＭＲ２。据高巍等　及张倩等　。　试　验结果，体外发酵７２　ｈ全株玉米青贮和羊草丙酸　产量显著高于玉米秸黄贮和玉米秸秆，这或许也　可以解释ＴＭＲ３和ＴＭＲ４丙酸日产量高于ＴＭＲ１　丙酸和丁酸日产量低于其他ＴＭＲ的趋势，同时丙　酸和丁酸日产量与乙酸相比极少。有些文献报　和ＴＭＲ２。不同ＴＭＲ丁酸产量增速常数和日产量　具有显著差异，其中ＴＭＲ３丁酸产量增速常数及　日产量最高，与高巍等　和张倩等　踟得出的全株　玉米青贮和玉米秸秆丁酸产量分别高于玉米秸黄　贮和羊草结果相反。这可能是单一粗饲料与组合　道，粗饲料之间组合效应，可通过营养素间的互补　有效平衡单一粗饲料碳、氮不平衡的缺陷，为瘤胃　微生物创造分解纤维素的条件，进而有利于瘤胃　微生物的生长繁殖，提高组合粗饲料的整体可发　酵水平　。　Ｉ２　。　在本研究中，奶牛瘤胃体外发酵乙酸生成动　力学参数中乙酸产量潜在增幅、增速常数及日产　量在不同ＴＭＲ间差异显著或极显著，ＴＭＲ２乙酸　产量增速常数显著高于其他ＴＭＲ，从而导致　粗饲料对丁酸产量影响不同所致，关于此问题可　在今后试验中进一步求证。　在已有的大量奶牛试验研究报道中，有关瘤　胃内ＶＦＡ变化比较，大多以ＴＶＦＡ和各ＶＦＡ产量　进行报道，并未考虑到奶牛个体瘤胃容积和瘤胃　壁ＶＦＡ吸收效率差异所造成的影响。在Ｓｕｔｔｏｎ　ｌ２期　白萨茹拉等：不同粗饲料组合全混合Ｅｔ粮对泌乳奶牛体外瘤胃挥发性脂肪酸　２９２５　等　的研究中，试图使用同位素铬标记的乙二胺　四乙酸（Ｃｒ—ＥＤＴＡ）和聚乙二醇（ＰＥＧ）标记法估测　泌乳奶牛（体重６５０　ｋｇ，日均产奶量为１７．８　ｋｇ）瘤　胃容积，但因测定结果变异很大，最终不得不采用　瘤胃食糜掏空法估测瘤胃容积，结果发现，精粗比　为６０：４０时，固相食糜容量平均值为７７．０　ｋｇ，液相　食糜容量平均值６６．９　ｋｇ。Ｓｕｔｔｏｎ等　剐的试验奶　牛产奶量与本试验中泌乳牛十分相近。综合考虑　到本试验中所使用奶牛体重差异，设定瘤胃容积　为５４　Ｌ或许比较合理。　尽管Ｃｏｒｌｅｙ等　利用绵羊瘤胃液通过体外　批次培养发酵试验法所测得乙酸、丙酸、丁酸日产　量与文献报道的绵羊体内法测定结果＿ｌ　十分相　近，但与Ｓｕｔｔｏｎ等Ｅ１８］用碳同位素标记ＶＦＡ所测定　的奶牛每天乙酸、丙酸和丁酸日产量分别为５６．５、　１６．８、６．５　ｍｏｌ／ｄ，Ｄａｖｉｓｌ２　饲喂高精饲料低纤维素　饲粮奶牛，用碳同位素标记乙酸，测定的乙酸Ｅｔ产　量为２８．１　ｍｏｌ／ｄ，Ｂａｕｍａｎ等　用同种方法测定的　饲喂高精饲料低纤维素饲粮奶牛丙酸日产量　３１．０　ｍｏｌ／ｄ相比，本试验中体外批次法所测算获得　的这些ＶＦＡ日产量偏低，说明体外批次法不能完　全真实而只能相对反映活体牛瘤胃内饲料的发酵　效率，与同位素示踪体内法ＶＦＡ日产量测定值相　比，体外批次培养法不适于测算奶牛ＶＦＡ日　产量。　４　结　论　不同粗饲料组合ＴＭＲ瘤胃微生物发酵乙酸、　丙酸和丁酸生成动力学参数存在显著差异，但采　用体外批次培养法测算的奶牛瘤胃乙酸、丙酸、丁　酸Ｅｔ产量较同位素示踪体内法偏低，故不适于测　算奶牛体内ＶＦＡ　Ｅｔ产量。　参考文献：　［１］　ＧＲＵＢＢ　Ｊ　Ａ，ＤＥＨＯＲＩＴＹ　Ｂ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａｎ　ａｂｒｕｐｔ　ｃｈａｎｇｅ　ｉｎ　ｒａｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ａ１ｌ　ｒｏｕｇｈａｇｅ　ｔｏ　ｈｉｇｈ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ　ｕｐｏｎ　ｌｕｍｅｎ　ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｎｕｍｂｅｒｓ　ｉｎ　ｓｈｅｅｐ［Ｊ］．Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９７５，３０（３）：４０４—４１２．　［２］ＬＥＥＤＬＥ　Ｊ　Ａ，ＢＲＹＡＮＴ　Ｍ　Ｐ，ＨＥＳＰＥＬＬ　Ｒ　Ｂ．Ｄｉｕｒ—　ｎａｌ　ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｎｕｍｂｅｒｓ　ａｎｄ　ｆｌｕｉｄ　ｐａｒａｍｅ—　ｔｅｒｓ　ｉｎ　ｒｕｍｉｎａｌ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ａｎｉｍａｌｓ　ｆｅｄ　ｌｏｗ－・ｏｒ　ｈｉｇｈ・－　ｆｏｒａｇｅ　ｄｉｅｔｓ［Ｊ］．Ａｐｐｌｉｅｄ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｍｉｃｒｏｂｉ—　ｏｌｏｇｙ，１９８２，４４（２）：４０２—４１２．　［３］ＤＥＨＯＲＩＴＹ　Ｂ，ＴＩＲＡＢＡＳＳＯ　Ｐ，ＧＲＩＦＯ　Ａ．Ｍｏｓｔ一　ｐｒｏｂａｂｌｅ—ｎｕｍｂｅｒ　ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ　ｆｏｒ　ｅｎｕｍｅｒａｔｉｎｇ　ｌｕｍｉｎａｌ　ｂａｃｔｅｒｉａ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｔｈｅ　ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ａｎｄ　ｃｅｌｌｕｌｏｌｙｔｉｃ　ｎｕｍｂｅｒｓ　ｉｎ　ｏｎｅ　ｍｅｄｉｕｍ［Ｊ］．Ａｐｐｌｉｅｄ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９８９，５５（１　１）：　２７８９—２７９２．　［４］　ＨＵＮＧＡＴＥ　Ｒ．ＭＡＨ　Ｒ　Ａ．ＳＩＭＥＳＥＮ　Ｍ．Ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｕ—　ｍｅｎ　ｏｆ　ｌａｃｔａｔｉｎｇ　ｃｏｗｓ［Ｊ］．Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，　１９６１，９（６）：５５４—５６１．　［５］　ＢＥＲＧＭＡＮ　Ｅ　Ｎ，ＲＥＩＤ　Ｒ　Ｓ，ＭＯＩＲＡ　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎｔｅｒ—　ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｈｅｅｐ　ｌｕｍｅｎ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｊｏｕｍａｌ，１９６５，９７　（１）：５３—５８．　［６］　ＬＥＮＧ　Ｒ　Ａ，ＬＥＯＮＡＲＤ　Ｇ　Ｊ．Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｃｅｔｉｃ，ｐｒｏｐｉｏｎｉｃ　ａｎｄ　ｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｕｌｍｅｎ　ｏｆ　ｓｈｅｅｐ［Ｊ］．Ｂｒｉｉｔｓｈ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｕ—　ｔｒｉｔｉｏｎ，１９６５，１９（１）：４６９—４８４．　［７］　ＧＲＡＹ　Ｆ　Ｖ，ＷＥＬＬＥＲ　Ａ　Ｆ，ＰＩＬＧＲＩＭ　Ａ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕｍｅｎ．　ＩＩＩ．Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｂｙ　ｔｗｏ　ｉｓｏｔｏｐｅ　ｄｉｌｕｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ［Ｊ］．Ｃｒｏｐ　ａｎｄ　Ｐａｓｔｕｒｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，　１９６６，１７（１）：６９—８０．　［８］　冯仰廉．反刍动物营养学［Ｍ］．北京：科学出版社，　２００４：１３２—１４４．　［９］　ＷＥＳＴＯＮ　Ｒ　Ｈ．ＨＯＧＡＮ　Ｊ　Ｐ．Ｔｈｅ　ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐａｓｔｕｒｅ　ｐｌａｎｔｓ　ｂｙ　ｓｈｅｅｐ．Ｉ．Ｒｕｍｉｎａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ　ｂｙ　ｓｈｅｅｐ　ｏｆｆｅｒｅｄ　ｄｉｅｔｓ　ｏｆ　ｒｙｅｇｒａｓｓ　ａｎｄ　ｆｏｒ—　ａｇｅ　ｏａｔｓ［Ｊ］．Ｃｒｏｐ　ａｎｄ　Ｐａｓｔｕｒｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９６８，１９（３）：　４１９—４３２．　［１０］　ＷＥＬＬＥＲ　Ｒ　Ａ，ＧＲＡＹ　Ｆ　Ｖ，ＰＩＬＧＲＩＭ　Ａ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕｍｅｎ．　１Ｖ．Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ　ａｎｄ　ｔｏｔａｌ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ［Ｊ］．Ｃｒｏｐ　ａｎｄ　Ｐａｓｔｕｒｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９６７，１８（１）：１０７—１１８．　［１１］　ＧＲＡＹ　Ｆ　Ｖ，ＰＩＬＧＲＩＭ　Ａ　Ｆ，ＷＥＬＬＥＲ　Ｒ　Ａ．Ｆｅｒｍｅｎ—　ｔａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕｍｅｎ　ｏｆｔｈｅ　ｓｈｅｅｐ：Ｉ．Ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ　ａｎｄ　ｍｅｔｈａｎｅ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａ—　ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｗｈｅａｔｅｎ　ｈａｙ　ａｎｄ　ｌｕｃｅｒｎｅ　ｈａｙ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏ—　ｏｒｇａｎｉｓｍｓ　ｒｆｏｍ　ｔｈｅ　ｌｕｍｅｎ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎ—　ｔａｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９５１，２８（１）：７４—８２．　［１２］　ＢＡＲＣＲＯＦＦ　Ｊ，ＭＣＡＮＡＬＬＹ　Ｒ，ＰＨＩＬＬＩＰＳＯＮ　Ａ　Ｔ．　Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ａｃｉｄｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ａｌｉｍｅｎｔａｒｙ　ｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｈｅｅｐ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ａｎｉｍａｌｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｅｘｐｅｒｉ—　ｍｅｎｔａｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９４４，２０（２）：１２０—１２９．　［１３］　ＧＲＡＹ　Ｆ　Ｖ，ＰＩＬＧＲＩＭ　Ａ　Ｆ．Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕ—　ｍｅｎ　ｏｆｔｈｅ　ｓｈｅｅｐ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，１９５０，１６６：４７８．　［１４］　ＢＥＲＧＭＡＮ　Ｅ．Ｅｎｅｒｇｙ　ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｔｒａｃｔ　ｉｎ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｓｐｅｃｉｅｓ　２９２６　动物营养学报　２５卷　［Ｊ］．Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗｓ，１９９０，７０（２）：５６７—５９０．　［１５］　ＣＯＲＬＥＹ　Ｒ　Ｎ，ＭＵＲＰＨＹ　Ｍ　Ｒ．Ａｎ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ　ｆｏｒ　ｍｅａｓｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｕｍｅｎ　ｕｎｄｅｒ　ｄｙｎａｍｉｃ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｓｍａｌｌ　Ｒｕ—　ｍｉｎａｎｔ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００４，５４（３）：２１９—２２５．　［１６］　冯仰廉，陆治年．奶牛营养需要和饲料成分［Ｍ］．３　版．北京：中国农业科技出版社，２００７．　［１７］　ＭＥＮＫＥ　Ｋ　Ｈ，ＳＴＥＩＮＧＡＳＳ　Ｈ．Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｎｅｒ—　ｇｅｔｉｃ　ｆｅｅｄ　ｖａｌｕｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｇａｓ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｕｓｉｎｇ　ｌｕｍｅｎ　ｆｌｕｉｄ［Ｊ］．Ａｎｉｍａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１９８８，２８（７）：７—５５．　［１８］　ＳＵＴＴＯＮ　Ｊ　Ｄ，ＤＨＡＮＯＡ　Ｍ　Ｓ，ＭＯＲＡＮＴ　Ｓ　Ｖ，ｅｔ　ａ１．　Ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｃｅｔａｔｅ，ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ，ａｎｄ　ｂｕｔｙ—　ｒａｔｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕｍｅｎ　ｏｆ　ｌａｃｔａｔｉｎｇ　ｄａｉｒｙ　ＣＯＷＳ　ｇｉｖｅｎ　ｎｏｒｍａｌ　ａｎｄ　ｌｏｗ—ｒｏｕｇｈａｇｅ　ｄｉｅｔｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｄａｉｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，　２００３，８６（１１）：３６２０—３６３３．　［１９］　ＬＥＮＧ　Ｒ　Ａ，ＢＲＥＴＴ　Ｄ　Ｊ．Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｃｅｔｉｃ，ｐｒｏｐｉｏｎｉｃ　ａｎｄ　ｂｕ—　ｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕｍｅｎ　ｏｆ　ｓｈｅｅｐ　ｏｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｄｉｅｔｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅｓ　ａｎｄ　ｃｏｎｃｅｎ—　ｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆｔｈｅｓｅ　ａｃｉｄｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｕｌｍｅｎ［Ｊ］．Ｂｒｉｉｔｓｈ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，１９６６，２０（３）：５４１—５５２．　［２０］　刘大程，卢德勋，侯先志，等．不同品质粗饲料Ｅｔ粮　对瘤胃发酵及主要纤维分解菌的影响［Ｊ］．中国农　业科学，２００８，４１（４）：１１９９—１２０６．　［２１］　胡红莲，卢德勋，刘大程，等．Ｅｔ粮不同ＮＦＣ／ＮＤＦ比　对奶山羊瘤胃ｐＨ，挥发性脂肪酸及乳酸含量的影　响［Ｊ］．动物营养学报，２０１０，２２（３）：５９５—６０１．　［２２］　金鑫．不同ＮＦＣ／ＮＤＦ比例的日粮对奶牛瘤胃代谢　及乳脂前体物生成的影响研究［Ｄ］．博士学位论　文．北京：中国农业大学，２０１２．　［２３］　ＳＩＬＶＡ　Ａ　Ｔ，ＧＲＥＥＮＨＡＬＧＨ　Ｊ，ＯＲＳＫＯＶ　Ｅ．Ｉｎｆｌｕ—　ｅｎｃｅ　ｏｆ　ａｍｍｏｎｉａ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｉｎｔａｋｅ，ｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｗｅｉｇｈｔ　ｇａｉｎ　ｏｆ　ｓｈｅｅｐ　ａｎｄ　ｃａｔｔｌｅ　ｏｎ　ｂａｒｌｅｙ　ｓｒｔａｗ　ｄｉｅｔｓ［Ｊ］．Ａｎｉｍａｌ　Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，　１９８９，４８（１）：９９—１０８．　［２４］　李申发．苜蓿，黄贮及玉米秸秆组合效应研究［Ｄ］．　博士学位论文．长春：吉林农业大学，２００７．　［２５］　雷冬至，金曙光，乌仁塔．用体外产气法评价不同粗　饲料与相同精料间的组合效应［Ｊ］．饲料工业，　２００９，３０（３）：３０—３３．　［２６］　布同良，刘建新．体外产气法评定青贮玉米，羊草和　苜蓿草之间的组合效应［Ｄ］．杭州：浙江大学，　２００６．　［２７］　高巍，王新峰，潘晓亮，等．玉米秸青贮与黄贮及苜　蓿干草的体外动态消化研究［Ｊ］．石河子大学学报，　２００２，６（３）：２２２—２２５．　［２８］　张倩，夏建民，李胜利，等．不同比例压块秸秆与羊　草组成粗饲料对奶牛瘤胃发酵和生产性能的影响　［Ｊ］．动物营养学报，２０１０，２２（２）：４７４—４８０．　［２９］　ＤＡＶＩＳ　Ｃ　Ｌ．Ａｃｅｔａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕｍｅｎ　ｏｆ　ＣＯＷＳ　ｆｅｄ　ｅｉｔｈｅｒ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｒ　ｌｏｗ—ｉｆｂｅｒ，ｈｉｇｈ－ｇｒａｉｎ　ｄｉｅｔｓ［Ｊ］．　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｄａｉｙｒ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９６７，５０（１Ｏ）：１６２１—　１６２５．　［３０］　ＢＡＵＭＡＮ　Ｄ　Ｃ，ＤＡＶＩＳ　Ｃ　Ｌ，ＢＵＣＨＯＬＴＺ　Ｈ．Ｐｒｏｐｉｏ—　ｎａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕｍｅｎ　ｏｆ　ＣＯＷＳ　ｆｅｄ　ｅｉｈｔｅｒ　ａ　ｃｏｎ—　ｔｒｏｌ　ｏｒ　ｈｉｇｈ—ｇｒａｉｎ，ｌｏｗ—ｉｆｂｅｒ　ｄｉｅｔ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｄａｉｙｒ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７１，５４（９）：１２８２—１２８７．　１２期　白萨茹拉等：不同粗饲料组合全混合日粮对泌乳奶牛体外瘤胃挥发性脂肪酸　２９２７　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　Ｒｏｕｇｈａｇｅ　Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　Ｔｏｔａｌ　Ｍｉｘｅｄ　Ｒａｔｉｏｎｓ：Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　Ｋｉｎｅｔｉｃ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ　Ｒｕｍｉｎａｌ　Ｖｏｌａｔｉｌｅ　Ｆａｔｔｙ　Ａｃｉｄ　Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｌａｃｔａｔｉｎｇ　Ｄａｉｒｙ　Ｃｏｗｓ　ＢＡＩ　Ｓａｒｕｕｌ　ＹＡＮＧ　Ｈｏｎｇｊｉａｎ　ＬＩ　Ｓｈｅｎｇｌｉ　（Ｓｔａｔｅ　Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，　Ｃｈｉｎａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１００１９３，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｗａｓ　ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｒｏｕｇｈａｇｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｏｔａｌ　ｍｉｘｅｄ　ｒａｔｉｏｎｓ（ＴＭＲｓ）ｏｎ　ｋｉｎｅｔｉｃ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｆｎ　ｖｉｔｒｏ　ｒｕｍｉｎａ１　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ（ＶＦＡ）ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌａｃｔａｔｉｎｇ　ｄａｉｒｙ　ｃｏｗｓ．Ｆｏｕｒ　Ｈｏｌｓｔｅｉｎ　ｃｏｗｓ　ｗｉｔｈ　ｓｉｍｉｌａｒ　ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ，ａｇｅ，ｌａｃｔａｔｉｏｎ　ｐｅｒｉｏｄ　ａｎｄ　ａｖｅｒａｇｅ　ｄａｉｌｙ　ｍｉｌｋ　ｙｉｅｌｄ，　ａｎｄ　ｆｉｔｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｐｅｒｍａｎｅｎｔ　ｒｕｍｉｎａｌ　ｆｉｓｔｕｌａｓ．ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ａｎｉｍａｌｓ　ａｎｄ　ｆｅｄ　ｆｏｕｒ　ＴＭＲｓ．Ｆｏｕｒ　ＴＭＲｓ　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ　ｔｏ　ｒｏｕｇｈａｇｅ　ｗａｓ　６１：３９．Ｒｏｕｇｈａｇｅ　ｃｏｍｂｉ＿　ｎａｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｓｉｇｎｅｄ　ａｓ　ｆｏｌｌｏｗｓ：１００％ｃｏｒｎ　ｓｔｏｖｅｒ（ＴＭＲ１），５０％ｃｏｍ　ｓｔｏｖｅｒ＋５０％ｅｎｓｉｌｅｄ　ｃｏｒｎ　ｓｔｏｖｅｒ　（ＴＭＲ２），５０％ｅｎｓｉｌｅｄ　ｃｏｒｎ　ｓｔｏｖｅｒ＋５０％Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｌｄｒｙｅ　ｈａｙ（ＴＭＲ３）ａｎｄ　５０％Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｌｄｒｙｅ　ｈａｙ＋　５０％ｗｈｏｌｅ　ｃｏｒｎ　ｓｉｌａｇｅ（ＴＭＲ４）．Ａｆｔｅｒ　１　５一ｄａｙ　ｐｒｅ—ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｐｅｒｉｏｄ，ａｎ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｂａｔｃｈ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｗａｓ　ｐｅｒ—　ｆｏｒｍｅｄ　ｆｏｒ　２，５，ｌ０，ｌ４，２０，２７，３６，４８　ａｎｄ　７２　ｈ，ｉｎ　ｗｈｉｃｈ　ＴＭＲｓ　ｆｅｄ　ｔｏ　ｅａｃｈ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ｃｏｗｓ　ｗｅｒｅ　ｃｈｏｓｅｎ　ａｓ　ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ａｓ　ｆｏｌｌｏｗｓ：ｔｈｅ　ｌｏｗｅｓｔ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｃｅｔａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｃ—　ｃｕｒｒｅｄ　ｉｎ　ＴＭＲ４（４６．８　ｍｍｏ１／Ｌ），ａｎｄ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　１ｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｏｔｈｅｒ　ＴＭＲｓ（Ｐ＜０．０１）；ＴＭＲ２　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｇｒｅａｔｅｓｔ　ａｃｃｅｌｅｒａｔｅ　ｃｏｎｓｔａｎｔ　ｏｆ　ａｃｅｔａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ（０．１　４％／ｈ）　ａｎｄ　ｄａｉｌｙ　ａｃｅｔａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　（２９．０１　ｍｏＬ／ｄ）．ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｏｔｈｅｒ　ＴＭＲｓ（Ｐ＜０．０５　ｏｒ　Ｐ＜０．０５）．ＴＭＲ２　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｌｏｗｅｓｔ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ａｍｐｌｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ（８．０　ｍｍｏｌ／ｄ），ａｎｄ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｏｔｈｅｒ　ＴＭＲｓ（Ｐ＜０．０１），ｗｈｉｌｅ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ＴＭＲ１（１３．５　ｍｍｏ１／Ｌ）ｗａｓ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ，ｂｕｔ　ｗａｓ　ｎｏｔ　ｓｉｇ—　ｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｆｒｏｍ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ＴＭＲ３　ａｎｄ　ＴＭＲ４（Ｐ＜０．０５）：ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ａｃｃｅｌ—　ｅｒａｔｅ　ｃｏｎｓｔａｎｔ　ｏｆ　ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ａｍｏｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ＴＭＲｓ（Ｐ＞０．０５）；ＴＭＲ２　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｌｏｗｅｓｔ　ｄａｉｌｙ　ｐｒｏｐｉ＿　ｏｎａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ（１．３５　ｍｏ１／ｄ）．ｗｈｉｃｈ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　１ｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ＴＭＲ３　ａｎｄ　ＴＭＲ４（Ｐ＜０．０５）．　Ｎｏ　ｓｉｇｎｉｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｉｆｎ　ｔｈｅ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｕｔｙｒａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ａｍｏｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ＴＭＲｓ（Ｐ＞０．０５）；ＴＭＲ３　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｇｒｅａｔｅｓｔ　ａｃｃｅｌｅｒａｔｅ　ｃｏｎｓｔａｎｔ　ｏｆ　ｂｕｔｙｒａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ（０．０９１％／ｈ，Ｐ＜０．０１）　ａｎｄ　ｄａｉｌｙ　ｂｕｔｙｒａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ（２．８２　ｍｏｌ／ｄ，Ｐ＜０．０５），ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｏｔｈｅｒ　ＴＭＲｓ．Ｉｎ　ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ．ＴＭＲｓ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｒｏｕｇｈａｇｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ　ｅｘｈｉｂｉｔ　ｒｅｍａｒｋａｂｌｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｋｉｎｅｔｉｃ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｏｆ　ａｃｅｔａｔｅ，ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ　ａｎｄ　ｂｕｔｙｒａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｖａｌｕｅｓ　ｏｆ　ｄａｉｌｙ　ａｃｅｔａｔｅ，ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ　ａｎｄ　ｂｕｔｙｒａｔｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｅｓｔｉｍａｔｅｄ　ｂｙ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｂａｔｃｈ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ａｒｅ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｅｓｔｉｍａｔｅｄ　ｂｙ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｉｓｏｔｏｐｉｃ　ｔｒａｃｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ．ｗｈｉｃｈ　ｓｕｇｇｅｓｔｓ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｆｎ　ｖｉｔｒｏ　ｂａｔｃｈ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｃａｎ　ｎｏｔ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｅｓｔｉｍａｔｅ　ｄａｉｒｙ　ＶＦＡ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｕｍｅｎ　ｆｏｒ　ｄａｉｙ　ＣＯＷＳ．『ｒ　ｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＡｎｉｍａｌ№ｔｒｉｔｉｏｎ，２０１３，２５（１２）：２９２０－２９２７］　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｒｏｕｇｈａｇｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ；ｄａｉｙ　ｃｏｗ；ｖｏｌａｔｒｉｌｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ；ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｂａｔｃｈ　ｃｕｌｔｕｒｅ　Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｇｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ，ａｓｓｏｃｉａｔｅ　ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｎｇ—ｈｏｎｇｊｉａｎ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ　（编辑王智航）